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依据PCR扩增仪工作原理选择机型
发布时间:2020-04-17   点击次数:137次
   依据PCR扩增仪工作原理选择机型
  热模块:
  由于PCR扩增仪器为96个样本同时进行扩增和检测,每个检测孔的温控完全一致是理想状态。不同PCR扩增仪的升降温原理不同,如压缩机、半导体或空气传导,升降温速度差异较大。有的PCR仪器由多个加热模块拼接,长期使用后容易出现某一个加热模块损坏,给临床报告带来麻烦。临床检测不单单有质量要求,有时容不得报告的拖延,因此选择整体加热模块和故障率的仪器,也是提升实验室质量的因素之一。
  光学模块:
  PCR扩增信号的采集,是荧光PCR仪器定量的灵魂,决定了96个样本孔间信号采集的均一性。从扩增管上部采集荧光信号的方式,由于经过管盖和空气部分,容易导致荧光信号衰减或折射,不同核酸浓度的扩增效率易产生差异,而侧面采集荧光信号仪器,则能有效避免上部荧光采集存在的缺陷,获得颜值较高的扩增曲线。因此,从侧面采集荧光信号的PCR仪器应该列为优先选择。此外,PCR仪器的激发光源优先选LED,寿命长、光亮度衰减慢,明显优于卤钨灯。
  软件系统
  计算机对每个扩增荧光信号进行拟合,依据标准曲线得出检测样本的结果,分析基线的设置原则以扩增曲线荧光值的5%为准,这恰好是PCR扩增仪容易产生噪音的位置,因此软件具有依据整体扩增趋势进行优化的功能显得尤为重要,从而使获得的荧光曲线趋于光滑,而得出重复性较好的结果。对扩增效率较差的PCR试剂盒,如果在没有曲线优化功能的PCR仪上扩增,将获得颜值极差的扩增曲线,甚至无法判断结果,针对这一情况,有些试剂厂家针对不同的PCR仪器制作相应的试剂盒。
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