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为什么说PCR仪是科研必备利器?
发布时间:2020-08-17   点击次数:50次
  PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制,可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。PCR仪的基础组成主要包括加热模块、热盖、散热口与显示屏等,通过系统快速升温、恒温、快速降温、恒温等PCR循环过程,完成所有扩增流程。根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
  PCR仪特点
  灵敏度高:能从100万个细胞中检出一个靶细胞,并且能够对病毒细菌进行精确的检测。
  简便、快速:一次性加好反应液,2——4 小时内可完成30——35次的DNA扩增过程。
  对标本的纯度要求低:可从血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等组织中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。
  PCR仪分类
  普通PCR仪:普通PCR仪是进行一次PCR扩增时只能运行一个特定退火温度的PCR仪。它主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。
  梯度PCR仪:梯度PCR仪是进行一次性PCR扩增时可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常有12种温度梯度,可针对不同DNA片段进行适合的扩增。它主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,在不设置梯度的情况下也可以做普通PCR扩增。
  原位PCR仪:原位PCR仪是用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。它能够保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,也能标出靶序列在细胞内的位置。该仪器在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。
  实时荧光定量PCR仪:实时荧光定量PCR仪是在普通PCR仪的基础上增加荧光信号激发采集系统和计算机分析处理系统,形成具有荧光定量功能的PCR仪器。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。该仪器有单通道,双通道和多通道之分,当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。其主要应用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等领域。
  pcr仪工作原理
  基于聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,简称PCR)而完成的DNA模板复制的过程。在特异性引物、耐热DNA聚、dNTPs、Mg2+均存在的情况下,模拟体内DNA复制的过程,经变性、退火、延伸等一系列循环过程,使基因片段大量扩增,进而达到基因复制的目的。简单的说,PCR基因扩增仪就是一个精密的温度控制仪。
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